Анализ мутаций при адреногенитальном синдроме
Врождённая гиперплазия надпочечников (ВГН) представляет собой группу наследственных аутосомно-рецессивных заболеваний, которые характеризуются нарушением работы ферментов, ответственных за метаболизм кортизола и/или альдостерона.
Состав исследования:
Выявление делеции гена CYP21A2
Выявлении конверсии гена CYP21A2
Выявление мутации -113 bp гена CYP21A2
Выявление мутации 12G в гене CYP21A2
Выявление мутации P30L в гене CYP21A2
Выявление делеции 8bp в гене CYP21A2
Выявление мутации F306+T в гене CYP21A
Выявление мутации I172N в гене CYP21A2
Выявление мутации I236N в гене CYP21A2
Выявление мутации M239K в гене CYP21A2
Выявление мутации P453S в гене CYP21A2
Выявление мутации Q318X в гене CYP21A2
Выявление мутации R356W в гене CYP21A2
Выявление мутации V237E в гене CYP21A2
Выявление мутации V281L в гене CYP21A2
Синонимы русские
Адреногенитальный синдром, врождённая гиперплазия надпочечников.
Синонимы английские
Congenital adrenal hyperplasia.
Название гена
CYP21A2.
Локализация гена на хромосоме
Локус 6p21.33.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.
Общая информация об исследовании
Врождённая гиперплазия надпочечников (ВГН) представляет собой группу наследственных аутосомно-рецессивных заболеваний, которые характеризуются нарушением работы ферментов, ответственных за метаболизм кортизола и/или альдостерона. Примерно в 90% случаев ВГН вызывается генетическими аберрациями в гене CYP21A2, что приводит к снижению активности фермента гидроксилазы-21. Изменение активности данного фермента приводит к нарушению синтеза 11-дезоксикортизола из 17-гидроксипрогестерона, что, в свою очередь, ведет к дефициту кортизола и альдостерона, повышению уровня АКТГ, гиперплазии коры надпочечников и усилению секреции надпочечниковых андрогенов. Так, при гомозиготных или компаундных гетерозиготных делециях и конверсиях гена CYP21A2, а также при небольшой делеции 8 нуклеотидов и точечных мутациях 113 bp, I236N, V237E, M239K, I172N, F306+T, I2G,Q318X активность фермента гидроксилазы-21 значительно снижается. При данных типах аберраций развивается простая вирилизирующая или сольтеряющая форма ВГН. Однако было показано, что в гетерозиготном состоянии данные аберрации также могут приводить к развитию неклассической формы ВГН.
После рождения у девочек и мальчиков с простой вирилизирующей формой ВГН наблюдаются симптомы гиперандрогении: увеличение клитора и полового члена, ускоренный рост, угревая сыпь, раннее оволосение лобка. При сольтеряющей форме ВГН наблюдаются гипотензия, гипонатриемия, гипогликемия, гиперкалиемия, рвота, гиперпигментация кожных покровов, нарушение развития, а также в некоторых случаях острый надпочечниковый криз. Исследования рекомендуется проводить при подозрении на вирилизирующую или сольтеряющую форму, а также в комплексе с мутациями, характерными для неклассической формы.
Неклассическая форма врождённой гиперплазии надпочечников (НВГН), вызванная мутациями гена CYP21A2, представляет собой частое наследственное аутосомно-рецессивное заболевание с распространенностью, достигающей 1:200. При данном заболевании наблюдается увеличенная продукция андрогеновых гормонов, что объясняет некоторые клинические проявления заболевания. При НВГН уровень активности фермента гидроксилазы-21 составляет 20-50%, что объясняет отсутствие тяжелых эндокринологических нарушений у пациентов данной группы, которые характерны для классических форм ВГН. Мутации P453S, R356W, V281L и P30L чаще всего вызывают НВГН.
Для пациентов с НВГН характерна значительная вариабельность клинических проявлений: в молодом возрасте может наблюдаться преждевременное половое созревание, акне, усиленный рост; во взрослом возрасте проявления могут включать в себя у мужчин олигоспермию и бесплодие, у женщин – аменорею, олигоменорею, ановуляцию, синдром поликистозных яичников, гирсутизм, акне и бесплодие. Рекомендуется проводить исследование при бесплодии у мужчин и женщин, акне, наурешении овуляционного цикла и менструаций.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики ВГН и дифференциальной диагностики синдрома поликистозных яичников, гиперандрогенемии и бесплодия.
Когда назначается исследование?
- При подозрении на ВГН.
- При дифференциальной диагностике у женщин:
- синдрома поликистозных яичников;
- гиперандрогении;
- бесплодия;
- гирсутизма;
- акне и нарушения цикла.
Что означают результаты?
Обнаружение гомозиготной мутации или компаундных гетерозигот подтверждает диагноз «ВГН». Было показано, что гетерозиготное носительство ряда мутаций может вызывать симптоматику неклассической формы ВГН.
Что может влиять на результат?
Хотя генетический тест является точным методом лабораторной диагностики, время клинических проявлений заболевания (пенетрантность болезни) зависят от внешней среды, индивидуальных генетических факторов. Наличие дупликации гена CYP21A2 может влиять на выявление других точечных аберраций.
Важные замечания
- Для получения заключения по результату обследования необходимо проконсультироваться у клинического генетика.
Кто назначает исследование?
Гинеколог, эндокринолог, репродуктолог, уролог.
Также рекомендуется
[08-003] 17-гидроксипрогестерон (17-ОПГ)
[08-030] Кортизол
[08-117] Тестостерон
Литература
- Neocleous V, Shammas C, Phedonos AA, Phylactou LA, Skordis N. Phenotypic variability of hyperandrogenemia in females heterozygous for CYP21A2 mutations. Indian J Endocrinol Metab. 2014 Nov;18(Suppl 1):S72-9. doi: 10.4103/2230-8210.145077.
- Maria I. Newa, Moolamannil Abrahama, Brian Gonzaleza, Miroslav Dumicb, Maryam Razzaghy-Azarc, David Chitayatd, Li Sune, Mone Zaidie, Robert C. Wilsonf, and Tony Yuena. Genotype–phenotype correlation in 1,507 families with congenital adrenal hyperplasia owing to 21-hydroxylase deficiency.Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Feb 12;110(7):2611-6.
Источник
Адреногенитальный синдром (АГС) – врожденное заболевание, характеризующееся прогрессирующей вирилизацией, ускоренным соматическим развитием, повышенной экскрецией гормонов коры надпочечников. Наиболее часто встречается тип гиперплазии надпочечников, вызванный дефицитом 21-гидроксилазы. Дефицит 21-гидроксилазы приводит к нарушению образования дезоксикортикостерона и 11-дезоксикортизола. Биосинтез андрогенов не нарушен, что приводит к их избыточной продукции еще при внутриутробном развитии. У новорожденных девочек отмечается разная степень маскулинизации от умеренной гипертрофии клитора до полного срастания губно-мошоночных складок с формированием предстательной железы, мошонки, полового члена с отверстием мочеиспускательного канала. Внутренние половые органы сформированы правильно, кариотип 46,ХХ. Отмечается гиперпигментация околососковой и генитальной областей. У мальчиков основными клиническими симптомами являются раннее половое развитие и низкий рост, связанный с преждевременным закрытием зон роста эпифизов.
Для вирильной формы адреногенитального синдрома, составляющей 1/3 случаев, характерны данные признаки, электролитный баланс, уровень кортизола и альдостерона в норме.
Сольтеряющая форма составляет 2/3 классических случаев адреногенитального синдрома. Кроме вирилизующего действия избытка андрогенов наблюдается нарушение солевого обмена в результате дефицита минералокортикоидов и вовлечения в патологический процесс ренин-альдостероновой системы. Заболевание проявляется в первые дни жизни срыгиванием, рвотой, потерей веса, сонливостью, признаками дегидротации, гипонатриемией, гиперкалиемией, метаболическим ацидозом.
При поздней (неклассической) форме адреногенитального синдрома отсутствуют симптомы вирилизации у девочек при рождении. Первые признаки появляются в подростковом возрасте. Для девочек характерно умеренное увеличение клитора, ускорение костного возраста, нарушение менструальной функции, маскулинное телосложение. У мальчиков признаки менее заметны, единственными симптомами могут быть ускорение костного возраста и преждевременное половое оволосение. Рост взрослых ниже среднего, фертильность снижена.
Во всех случаях заболевания отмечается повышение в моче уровня 17-кетостероидов и прегнантриола.
Тип наследования – аутосомно-рецессивный.
Популяционная частота – 1:1 000 000 неклассическая форма, 1:18 000 – классическая форма.
Ген, мутации в котором приводят к развитию АГС, картирован на хромосоме 6р21.3. Ген 21-гидроксилазы (CYP21OHB, CYP21А2) и псевдоген 21-гидроксилазы (CYP21OHA) организованы в тандем повторов с генами С4В и С4А комплемента между генами HLA-B и HLA-DR. Из-за высокой степени гомологии между повторами неравные рекомбинации и генная конверсия ответственны за большинство мутаций в этом локусе. Ген CYP21A2 состоит из 10 экзонов, имеет длину 6.3 т.п.н. Ген и псевдоген гомологичны на 98%. Гипотетический продукт псевдогена полностью не функционален. 30% обнаруженных мутаций составляет делеция гена CYP21A2. Эта мутация ответственна за развитие сольтеряющей формы заболевания. Другой мутацией, ответственной за развитие сольтеряющей формы, является мутация сайта сплайсинга во втором интроне (35%). Большинство из других мутаций в норме присутствует в псевдогене CYP21OHA и, вероятно, представляют собой результат генной конверсии. К сольтеряющей форме заболевания приводят мутации Q318X, кластер миссенс-мутаций в экзоне 6 (I235N/V236E/ M238K). Для вирильной формы характерна мутация I172N. За развитие неклассической формы заболевания с поздним началом ответственны, в большинстве случаев, мутации P30L, V281L, P453S. В Западной Европе 60% мутаций при неклассической форме АГС составляет мутация V281L.
В Центре молекулярной генетики проводится поиск 9 частых мутаций: делеции гена CYP21А2, мутации сайта сплайсинга в интроне 2, мутаций P30L, I172N, I235N/V236E/M238K, V281L, Q318X, R356W, P453S. Данный анализ проводится для больных детей с обязательным предоставленим материала их родителей. материал родителей может понадобиться для исследования т.к. при конверсии больших участков псевдогена последовательность гена CYP21А2 может включать в себя несколько мутаций. Поэтому при проведении анализа необходимо определить, находятся ли мутации на одной хромосоме или лежат на разных хромосомах. Наличие материала родителей поможет в этих случаях определить расположение мутаций на хромосомах. Также данный вид поиска мутаций возможен для родителей при отсутствии материала от больного ребенка.
Для проведения поиска частых мутаций в гене CYP21А2 (CYP21OHB) необходимо предоставить свежую кровь, взятую в пробирку с консервантом ЭДТА.
При проведении пренатальной (дородовой) ДНК-диагностики в отношении конкретного заболевания, имеет смысл на уже имеющемся плодном материале провести диагностику частых анеуплоидий (синдромы Дауна, Эдвардса, Шерешевского-Тернера и др), пункт 54.1. Актуальность данного исследования обусловлена высокой суммарной частотой анеуплоидий — около 1 на 300 новорожденных, и отсутствием необходимости повторного забора плодного материала.
Публикации по теме раздела
Адреногенитальный синдром
Источник
Биоматериал:
Венозная кровь в пробирку с ЭДТА (фиолетовая крышка) не менее 2-х мл.
Время исследования:
до 14 дней
Адреногенитальный синдром (врожденная гиперплазия надпочечников, АГС, hyperandrogenism) – это наследственное заболевание аутосомно-рецессивного типа, проявления которого связано с расстройством деятельности надпочечников и избыточной продукцией мужских стероидных гормонов – андрогенов.
Мужчинам с адреногенитальным синдромом присуще раннее половое созревание.
Женщинам — маскулинизация (появление признаков присущих мужчине), нарушение менструального цикла, невынашивание беременности или бесплодие.
Генетическим фактором развития АГС являются мутации в гене CYP21 (расположен на коротком плече 6 – ой хромосомы (6p21.33.)
Патогенетическая цепочка выглядит при этом так:
- мутации гена приводят к недостаточной выработке специфического фермента 21-гидроксилаза
- дефицит фермента 21-гидроксилаза не позволяет вырабатываться в адекватном количестве кортизолу и альдостерону
- их недостаток постоянно активирует надпочечники, они гиперплазируются, вырабатывая при этом повышенное количество мужских гормонов-андрогенов
- развивается АСГ.
Показания к исследованию:
- у женщины нарушен менструальный цикл, имеется бесплодие и/или факт привычного невынашивания беременности, при этом чрезмерно развиты мужские половые признаки
- выявлен повышенный уровень 17-гидроксипрогестерона
- имеются эпизоды этого заболевания у близких родственников
- заболевание заподозрено и необходимо подтверждение диагноза до появления клинической картины
- если у новорожденного ребенка при неонатальном скрининге выявлен маркер адреногенитального синдрома.
Почему это исследование важно и используется для пренатальной (дородовой) и постнатальной (после рождения) диагностики АСГ? Генетически обусловленный дефицит фермента 21-гидроксилазы начинает проявлять себя фенотипически уже внутриутробно – в аномалиях строения половых органов плода. В постнатальном периоде необходима незамедлительная коррекция синдромальных проявлений, в ином случае происходит быстрое прогрессирование вирилизации — развитие мужских вторичных половых признаков у девочек.
Метод исследования — полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Задать вопрос
Специальной подготовки пациента не требуется.
Задать вопрос
По результатам исследования заключение выдается по каждому генетическому маркеру:
— мутация не выявлена;
— выявлена мутация в гетерозиготном состоянии;
— выявлена мутация в гомозиготном состоянии.
Задать вопрос
Как сдается анализ. 5 простых шагов
2. Сдать
анализы в нашей лаборатории
3. Ожидать
результата анализа
4. Получить
письмо с результатом анализа на email.
Если информация не поступила, свяжитесь с клиникой в Москве
5. Записаться
на консультацию по результатам исследования
Публикации
Невынашивание является самым частым осложнением беременности на ранних сроках.
29 апр 2020
«Зрелые родители» часто являются источником генетической патологии для их потомства. И чем старше возраст родителей, тем выше риск.
18 мар 2020
Возможно, вы уже прошли дорогостоящие длительные дополнительные медицинские обследования, но так и не получили ответ на ваш вопрос. Возможно, вы в настоящий момент готовитесь к выскабливанию. В любом случае, мы готовы помочь вам и вашему врачу в решении проблемы.
10 апр 2019
Источник
Адреногенитальный синдром (АГС) также известен как врожденная дисфункция коры надпочечников (ВДКН) или врожденная гиперплазия коры надпочечников (ВГКН). Синдром объединяет заболевания с аутосомно-рецессивным типом наследования, в основе которых лежит дефект одного из ферментов метаболического пути синтеза стероидов.
Заболевание вызвано наследственным дефицитом ферментов, которые локализованы в коре надпочечников. Гормоны коры надпочечников включают минералокортикоиды (альдостерон), глюкокортикоиды (кортизол) и половые стероиды (тестостерон и эстроген). Синдром возникает, когда дефицит фермента приводит к снижению надпочечникового синтеза глюкокортикоидов. Происходит снижение ингибирующего влияния гормонов коры надпочечников на гипофиз, поэтому синтез и секреция адренокортикотропного гормона (АКТГ) увеличивается по механизму отрицательной обратной связи. АКТГ стимулирует увеличение размеров надпочечников и выработку ими промежуточных субстратов. Включаясь в другие пути синтеза, метаболиты вызывают повышение уровней других гормонов коры надпочечников — минералокортикоидов или андрогенов. Измененные уровни минералокортикоидов и половых гормонов приводят к аномалиям электролитного соотношения, проблемам с дифференциацией пола и другим признакам, и симптомам, в зависимости от дефицита фермента и его степени.
Частота встречаемости заболевания от 1:5000 до 1:67000.
Характеристика заболевания
ВГКН является одним из самых распространенных наследственных моногенных заболеваний, одновременно представляет собой вариант хронической первичной надпочечниковой недостаточности и группу патологии полового развития, а также половой дифференцировки. АГС включен в программу «Национальные приоритетные проекты» и введен в неонатальный скрининг. АГС в стертой (неклассической) форме является одной из причин нарушения репродуктивного здоровья (бесплодие, невынашивание беременности).
95% всех случаев ВДКН связаны с дефектом фермента 21-гидроксилазы. Остальные формы заболевания обусловлены недостаточностью ферментов:
- 17α-гидроксилазы (P450c17) с недостаточностью 17,20-лиазы или без нее (синдром Биглиери);
- 11β-гидроксилазы (P450c11): классическая и неклассическая форма;
- 3β-дегидрогеназы;
- 18-гидроксилазы (недостаточность альдостеронсинтетазы, дефицит P450c11);
- недостаточность ароматазы (P450aroma);
- 20, 22-десмолазы (синдром Прадера);
- P450-оксидоредуктазы (P450or)
Дефект 21-гидроксилазы: классификация и клинические проявления
Ген CYP21, кодирующий фермент 21-гидроксилазу, локализован на коротком плече 6-й хромосомы. Описано более пятидесяти мутаций этого гена, приводящих к синтезу фермента со степенью активности от 0 до 60 %.
Патогенетической сущностью синдрома является нарушение процесса перехода 17-гидроксипрогестерона и 11-дезоксикортикостерона в 11-дезоксикортизол (рис 1). Развивается гормональная дисфункция, которая сводится к снижению синтеза кортизола альдостерона и избыточному накоплению предшественников кортизола. Избыток прегненолона, прогестерона, 17-гидроксипрогестерона конвертируется в надпочечениковые андрогены.
Рис.1. Недостаточность 21-гидроксилазы. Штриховкой выделены стероиды, синтез которых заблокирован.
Так происходит угнетение выработки одних кортикостероидов при одновременном увеличении выработки других, вследствие дефицита того или иного фермента, обеспечивающего один из этапов стероидогенеза.
Существуют 3 варианта дефицита 21-гидроксилазы:
- дефицит 21-гидроксилазы с сольтеряющим синдромом;
- простая вирильная форма (неполный дефицит 21-гидроксилазы);
- неклассическая форма (постпубертатная).
В зависимости от типа нарушения гена 21-гидроксилазы (положение мутации, количество мутации, зиготность), наблюдаются потери активности фермента разной степени. Отсюда разнообразие клинических картин при ВДКН. Формы заболевания можно разделить по тяжести течения: сольтеряющая — тяжелая, простая вирильная — средняя, неклассическая — легкая.
Симптомы недостаточности 21-гидроксилазы
При классической вирильной форме адреногенитального синдрома, наружные половые органы у девочек сформированы по гетеросексуальному типу — гипертрофирован клитор, большие половые губы напоминают мошонку, вагина и уретра представлены урогенитальным синусом. У новорождённых мальчиков явных нарушений выявить не удаётся. С 2–4 лет у детей обоего пола появляются другие симптомы адреногенитального синдрома, то есть андрогенизации: формируется подмышечное и лобковое оволосение, развивается скелетная мускулатура, грубеет голос, маскулинизируется фигура, появляются юношеские угри на лице и туловище. В пубертатном периоде у девочек не растут молочные железы, не появляются менструации. При этом ускоряется дифференцировка скелета, и зоны роста закрываются преждевременно, это обусловливает низкорослость.
При сольтеряющей форме 21-гидроксилазной недостаточности, помимо вышеописанных симптомов, у детей с первых дней жизни отмечают признаки надпочечниковой недостаточности. Появляются вначале срыгивания, затем рвоты, возможен жидкий стул. Ребёнок быстро теряет массу тела, развиваются симптомы дегидратации, нарушения микроциркуляции, снижается артериальное давление, начинается тахикардия, возможна остановка сердца вследствие гиперкалиемии.
Неклассическая форма адреногенитального синдрома характеризуется ранним появлением вторичного оволосения, ускорением роста и дифференцировки скелета. У девочек пубертатного возраста возможны умеренные признаки гирсутизма, нарушения менструального цикла (первый цикл может запаздывать или начаться раньше времени). В позднем возрасте при небольших дефектах гена на адреногенитальный синдром может указывать наличие бесплодия в анамнезе. Менструальный цикл может быть нерегулярным и иметь тенденцию к задержке. Невынашивание беременности при адреногенитальном синдроме встречается у четверти женщин с дефектным геном.
Для диагностики необходимо выполнить генетический анализ. Генетическое исследование гена 21 гидроксилазы и поиск основных мутаций в нем часто применяется в качестве метода подтверждающей диагностики, когда есть клинические проявления заболевания и врач предполагает ВДКН.
Проведение молекулярно-генетического анализа рекомендовано в первую очередь:
- женщинам с диагнозом «замершая эмбриональная беременность»;
- женщинам с привычным невынашиванием беременности;
- женщинам с диагнозом СПКЯ неустановленной этиологии;
- девушкам пубертатного возраста с проявлениями неклассической формы ВДКН: олигоменореей, гирсутизмом, акне и интерсексуальным типом телосложения;
- девочкам младшего возраста с вирилизацией наружных гениталий для дифференциальной диагностики ВДКН с идиопатической врожденной вирилизацией наружных гениталий;
- детям младшего возраста (2–4 года) с признаками преждевременного полового созревания по мужскому типу для дифференциальной диагностики вирильной формы ВДКН с надпочечниковой недостаточностью, гермафродитизмом другого генеза, различными вариантами преждевременного полового созревания и андрогенпродуцирующей опухолью надпочечников.
Выявление мутаций в гене позволяют определять форму заболевания, прогнозировать его течение, а также определять вероятность рождения больного ребенка, возможности проведения пренатальной диагностики и лечения.
40.131 Анализ полиморфизмов гена стероид-21-гидролаза (CYP21,9 точек) (адреногенитальный синдром)
Источник