Диагностика антифосфолипидного синдрома в инвитро
Антитела к кардиолипину , IgG и IgM выявляют у 20-50% больных системной красной волчанкой и 3-20% больных другими системными ревматическими заболеваниями. Повторное невынашивание беременности и тромбозы нередко отмечают при системной красной волчанке. Клинические проявления антифосфолипидного синдрома (АФС) на фоне другого ревматического заболевания, сочетающиеся с характерными лабораторными признаками АФС, указывают на его «вторичный» генез.
До 50% всех случаев АФС являются «вторичными». Вторичный АФС может выявляться при системной красной волчанке, ювенильном ревматоидном артрите, синдроме Шегрена, склеродермиии, полимиозите, реже при ревматоидном артрите. Основным специфическим лабораторным показателем для этой группы заболеваний является АНФ (антинуклеарный фактор, выявляемый с применением клеточной линии НЕр2, см. тест № 1267). С антикардиолипиновыми антителами его роднит общий механизм возникновения аутоантител, обусловленный иммунной реакцией на антигены апоптотических фрагментов клеток (нуклеарные антигены и фосфолипиды клеточных мембран в таких фрагментах могут становиться иммуногенными, что приводит к формированию аутоантител). Антитела к кардиолипину, фосфолипидам и их белковым кофакторам (в частности, бета-2-гликопротеину 1) вызывают нарушения системы свертывания крови и других физиологических процессов, что приводит к тромбозам и повторным выкидышам. Одновременное выявление антинуклеарного фактора на клеточной линии НЕр-2 и антител к кардиолипину позволяет установить как риск развития АФС у больных аутоиммунными заболеваниями, так и диагностировать аутоиммунные заболевания у больных с клиникой АФС.
В связи с вовлеченностью антител к кардиолипину во множество патогенетических процессов, их выявление имеет большое значение при АФС и ассоциированных состояниях (см.показания). Кроме стимуляции протромботических механизмов, антикардиолипиновые антитела участвуют в индукции воспаления, нарушают функции эндотелия, нарушают функции трофобласта и плаценты, могут принимать участие в развитие атеросклероза. Выявление антител к кардиолипину указывает на высокий риск развития системной красной волчанки.
Интерпретация
Совместное обнаружение антикардиолипиновых антител и антинуклеарного фактора может подтвердить клинический диагноз — вторичный АФС на фоне системных ревматических заболеваний.
Увеличение содержания антител к кардиолипину, IgG или IgM является лабораторным критерием АФС, а также указывает на риск развития его симптомов. Риск тромбоза повышается с увеличением содержания антител. Выявление антител к кардиолипину, IgG и IgM должно рассматриваться в соответствии с действующими критериями антифосфолипидного синдрома 2006 года. Для иммунологического подтверждения АФС требуется подтверждение стабильного присутствия аутоантител, уровень антител должен был высоким, и эти значения должны сохраняться при повторном исследовании через 12 недель (см. таблицу критериев АФС и комментарии экспертов).
Положительные результаты определения антител к кардиолипину могут иногда выявляться при инфекционных заболеваниях и изредка у клинически здоровых лиц. В большинстве подобных случаев появление антител в невысоком титре — это преходящий феномен, не ведущий к формированию нарушений в системе свертывания крови.
Антинуклеарный фактор на НЕр-2 клеточной линии встречается при многих аутоиммунных заболеваниях, что позволяет использовать его в качестве универсального серологического показателя. С наибольшей частотой он выявляется при системной красной волчанке, ювенильном ревматоидном артрите, синдроме Шегрена, склеродермиии, полимиозите, реже при ревматоидном артрите.
Источник
Метод определения
Твёрдофазный иммуноферментный анализ (в наборе применяется смесь высоко очищенных отрицательно заряженных фосфолипидов — кардиолипин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол, фосфатидная кислота, насыщенная человеческим бета-2-гликопротеином).
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Важный диагностический критерий антифосфолипидного синдрома (АФС). Антитела к фосфолипидам (АФЛ) — это аутоиммунные, или аутоантитела класса IgG и IgM, действие которых направлено против основных компонентов клеточных мембран — фосфолипидов и, соответственно, против собственных клеток и тканей организма. Фосфолипиды могут быть отрицательно заряженными (фосфатидилсерин, кардиолипин), положительно заряженными (фосфатидилинозитол и фосфатидиловая кислота), нейтральными (фосфатидилхолин). Клеточные мембраны играют важную роль в инициации процессов свёртывания крови. Из анионных (отрицательно заряженных) АФЛ фосфатидилсерин является наиболее антигенным. Фосфатидилсерин находится на внутренней поверхности тромбоцитов и клеточных мембран эндотелия сосудов. При активации клеток фосфатидилсерин перемещается на поверхность клетки и принимает участие в формировании кровяного сгустка (тромба), входит в протромбиназный комплекс и играет физиологическую роль в коагуляции. Антитела к фосфолипидам (АФЛ) нарушают нормальное функционирование эндотелия кровеносных сосудов, вызывая васкулопатии (сужение сосудов) и образование сосудистых тромбов. Взаимодействие АФЛ с фосфолипидами представляет собой сложный феномен, в реализации которого важную роль играют так называемые кофакторы. Один из них — бета-2-гликопротеин, присутствующий в нормальной плазме и циркулирующий в ассоциации с липопротеинами (аполипопротеин Н). Он обладает естественной антикоагулянтной активностью. При АФС антифосфолипидные антитела связываются эндотелием сосудов в присутствии бета-2-гликопротеина, стимулируют синтез фактора Виллебранда, индуцируют активность тканевого фактора эндотелиальными клетками, стимулируют процесс гемокоагуляции. Высокий уровень антифосфолипидных антител характерен для антифосфолипидного синдрома (АФС), при котором поражаются сосуды сердца, головного мозга, почек, печени, надпочечников. У мужчин высокий титр антител к фосфолипидам часто сопровождается риском развития тромбоза вен, инфаркта миокарда, а у женщин — повторными выкидышами (чаще в 2 и 3 триместре беременности). Антитела к фосфолипидам клеток эндотелия сосудов нарушают равновесие между свёртывающей и противосвёртывающей системами в сторону образования тромбов. Подобные изменения микроциркуляции при беременности могут приводить к нарушению кровообращения также и в области плаценты и даже к отторжению плода. Кроме того, АФС может сопровождаться нарушением мозгового кровообращения с развитием инсульта, неврологической патологией, поражением кожи (сетчатое ливедо, кожные язвы). Частота обнаружения антител к фосфолипидам у здоровых людей составляет 2 — 4%, чаще пожилого, чем молодого возраста.
Пределы определения: 0,5 Ед/мл – 100 Ед/мл
Источник
Метод определения
дот-иммуноанализ, качественный тест.
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Определение 10 видов антител, направленных против фосфолипидов и их кофакторов, раздельно классов IgG и IgM (20 показателей, качественный формат) для использования в числе дополнительных обследований при диагностике АФС.
| Исследуемые антифосфолипидные антитела | |
| Антитела кардиолипину класса IgG | Антитела к кардиолипину класса IgM |
| Антитела к фосфатидной кислоте класса IgG | Антитела к фосфатидной кислоте класса IgM |
| Антитела к фосфатидилхолину класса IgG | Антитела к фосфатидилхолину класса IgM |
| Антитела к фосфатидилэтаноламину класса IgG | Антитела к фосфатидилэтаноламину класса IgM |
| Антитела к фосфатидил-глицеролу класса IgG | Антитела к фосфатидилглицеролу класса IgM |
| Антитела к фосфатидилинозитолу класса IgG | Антитела к фосфатидилинозитолу класса IgM |
| Антитела к фосфатидилсерину класса IgG | Антитела к фосфатидилсерину класса IgM |
| Антитела к аннексину V класса IgG | Антитела к аннексину V класса IgM |
| Антитела к бета-2 гликопротеину класса IgG | Антитела к бета-2 гликопротеину класса IgM |
| Антитела к протромбину класса IgG | Антитела к протромбину класса IgM |
Антифосфолипидный синдром (АФС) — аутоиммунное заболевание, которое характеризуется рецидивирующими тромбозами и/или привычным невынашиванием беременности, ассоциированными со стабильным присутствием антифосфолипидных антител. АФС может быть первичной патологией, либо наблюдаться на фоне другого основного заболевания, в частности, системной красной волчанки (имеет место у около 35% пациентов с СКВ). Это наиболее распространенный вид приобретенной тромбофилии, которая может стать причиной тромбоза и фактором риска невынашивания беременности или преждевременных родов на фоне тяжелой преэклампсии или плацентарной недостаточности.
В основе диагностики этой патологии лежат классификационные критерии антифосфолипидного синдрома (международный консенсус, Сидней, 2006), которые позволяют поставить такой диагноз, если он подтвержден как минимум одним клиническим и одним лабораторным критерием. В число лабораторных критериев АФС включены 3 клинически наиболее значимых маркера: обнаружение значимых титров антител к кардиолипину или бета-2-гликопротеину 1 и выявление рекомендуемыми методами волчаночного антикоагулянта в функциональном фосфолипид-зависимом коагулологическом тесте. Эти исследования, относят к тестам первой линии при подозрении на АФС (см. комплекс тестов ОБС55 Антифосфолипидный синдром, лабораторные критерии). Однако, если результаты указанных тестов отрицательны, но остаются веские клинические подозрения на АФС, могут использоваться расширенные лабораторные исследования, включающие оценку наличия неклассических («некритериальных») аутоантител к фосфолипидам и их белковым кофакторам.
Антифосфолипидные антитела при АФС реагируют преимущественно не с самими фосфолипидами, а с белок-фосфолипидными комплексами, которые образуются при связывании белков с отрицательно-заряженными фосфолипидами. К белковым кофакторам, играющим роль в формировании мишеней антифосфолипидных антител при АФС, относится прежде всего бета-2-гликопротеин 1, а также аннексин V и протромбин. В группу антифосфолипидных антител включают антититела к кардиолипину, фосфатидилхолину, фосфатидилэтаноламину, фосфатидилглицеролу, фосфатидилинозитолу, фосфатидилсерину и их белковым кофакторам, в том числе — бета-2-гликопротеину 1, аннексину V и протромбину, а также волчаночный антикоагулянт, выявляемый в коагулологическом тесте. Патогенные свойства таких аутоантител связывают с индукцией воспаления, нарушением функционирования тромбоцитов, эндотелия, трофобласта, плаценты и тромбогенным потенциалом.
Предлагаемое комплексное исследование с использованием дот-иммуноанализа позволяет выявлять наличие антифосфолипидных антител, направленных против 7 разновидностей фосфолипидов и 3 основных белковых кофакторов фосфолипидов, раздельно по классам IgG и IgM – всего 20 видов серологической реактивности. Исследование такого спектра антител может давать дополнительную информацию для пациентов, негативных по основным лабораторным критериям АФС, а также для уточнения рисков у пациентов, позитивных по одному из лабораторных критериев. Выявление одновременной позитивности в серологических реакциях на разные антигены может указывать на больший риск развития тромбоза, невынашивания или патологии беременности.
Само по себе выявление антифосфолипидных антител недостаточно специфично для диагностики АФС, они встречаются при других аутоиммунных, инфекционных и лимфопролиферативных заболеваниях. Появление таких антител при инфекциях имеет временный характер, в таких случаях антитела обычно отсутствуют при повторном определении через 3-6 месяцев.
Литература
- Клинические рекомендации по лечению антифосфолипидного синдрома. Ассоциация ревматологов России. М., 2013.
- Корнюшина Е.А. с соавт. Профилактика потери беременности у женщин с циркуляцией аутоантител, не входящих в критерии антифосфоипидного синдрома. Журнал акушерства и женских болезней. 2018, том 67, вып. 5 с. 24-30.
- Лапин С.В. Тотолян А.А. Иммунологическая лабораторная диагностика аутоиммунных заболеваний. СПб, «Человек», 2010.
- Решетняк Т.М. Принципы диагностики и терапии антифосфолипидного синдрома. РМЖ, 2014, № 28, с. 2003-2011.
- Miyakis S., Lockshin M.D., Atsumi T. et al. International consensus statement on an update of the classification criteria for define antiphospholipid syndrome (APS). J Thromb Haemost. 2006. Vol. 4. Р. 295–306
- Nalli C, Somma V et al. Anti-phospholipid IgG antibodies detected by line immunoassay differentiate patients with anti-phospholipid syndrome and other autoimmune diseases. Auto Immun Highlights. 2018 May 29;9(1):6.
- Tektonidou MG, Andreoli L, Limper M, et al. EULAR recommendations for the management of antiphospholipid syndrome in adults. Ann Rheum Dis Epub ahead of print: 15 May 2019, doi:10.1136/annrheumdis-2019-215213
- The General Practice Guide to Autoimmune Diseases. Ed. by Shoenfeld Y., Meroni P.L. EASI. PABST, 2012. 331 p.
- Материалы фирмы — производителя реагентов.
Источник
Метод определения
Твёрдофазный иммуноферментный анализ (в наборе применяется смесь высоко очищенных отрицательно заряженных фосфолипидов — кардиолипин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол, фосфатидная кислота, насыщенная человеческим бета-2-гликопротеином).
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Важный диагностический критерий антифосфолипидного синдрома (АФС). Антитела к фосфолипидам (АФЛ) — это аутоиммунные, или аутоантитела класса IgG и IgM, действие которых направлено против основных компонентов клеточных мембран — фосфолипидов и, соответственно, против собственных клеток и тканей организма. Фосфолипиды могут быть отрицательно заряженными (фосфатидилсерин, кардиолипин), положительно заряженными (фосфатидилинозитол и фосфатидиловая кислота), нейтральными (фосфатидилхолин). Клеточные мембраны играют важную роль в инициации процессов свёртывания крови. Из анионных (отрицательно заряженных) АФЛ фосфатидилсерин является наиболее антигенным. Фосфатидилсерин находится на внутренней поверхности тромбоцитов и клеточных мембран эндотелия сосудов. При активации клеток фосфатидилсерин перемещается на поверхность клетки и принимает участие в формировании кровяного сгустка (тромба), входит в протромбиназный комплекс и играет физиологическую роль в коагуляции. Антитела к фосфолипидам (АФЛ) нарушают нормальное функционирование эндотелия кровеносных сосудов, вызывая васкулопатии (сужение сосудов) и образование сосудистых тромбов. Взаимодействие АФЛ с фосфолипидами представляет собой сложный феномен, в реализации которого важную роль играют так называемые кофакторы. Один из них — бета-2-гликопротеин, присутствующий в нормальной плазме и циркулирующий в ассоциации с липопротеинами (аполипопротеин Н). Он обладает естественной антикоагулянтной активностью. При АФС антифосфолипидные антитела связываются эндотелием сосудов в присутствии бета-2-гликопротеина, стимулируют синтез фактора Виллебранда, индуцируют активность тканевого фактора эндотелиальными клетками, стимулируют процесс гемокоагуляции. Высокий уровень антифосфолипидных антител характерен для антифосфолипидного синдрома (АФС), при котором поражаются сосуды сердца, головного мозга, почек, печени, надпочечников. У мужчин высокий титр антител к фосфолипидам часто сопровождается риском развития тромбоза вен, инфаркта миокарда, а у женщин — повторными выкидышами (чаще в 2 и 3 триместре беременности). Антитела к фосфолипидам клеток эндотелия сосудов нарушают равновесие между свёртывающей и противосвёртывающей системами в сторону образования тромбов. Подобные изменения микроциркуляции при беременности могут приводить к нарушению кровообращения также и в области плаценты и даже к отторжению плода. Кроме того, АФС может сопровождаться нарушением мозгового кровообращения с развитием инсульта, неврологической патологией, поражением кожи (сетчатое ливедо, кожные язвы). Частота обнаружения антител к фосфолипидам у здоровых людей составляет 2 — 4%, чаще пожилого, чем молодого возраста.
Пределы определения: 0,5 Ед/мл – 100 Ед/мл
Предпочтительно выдержать 4 часа после последнего приема пищи, обязательных требований нет.
- Рецидивирующие тромбозы сосудов, тромбоэмболии.
- Тромбоцитопения.
- Привычное невынашивание беременности (в/у гибель плода, выкидыши, преэклампсия).
- Ложноположительная реакция Вассермана.
- Коллагенозы (системная красная волчанка, узелковый периартериит).
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Единицы измерения в Независимой лаборатории ИНВИТРО: Ед/мл.
Референсные значения:
Повышение уровня:
первичный АФС:
патология сосудов — инсульты, инфаркты внутренних органов, гангрена конечностей, тромбофлебит (тромбоз глубоких вен конечностей);
привычное невынашивание беременности — рецидивирующие необъяснимые спонтанные аборты в I триместре или внутриутробная гибель плода во II — III триместре, развитие HELLP-синдрома при патологии беременности (гемолиз, повышение активности печёночных ферментов, снижение содержания тромбоцитов);
вторичный АФС:
воспалительные, аутоиммунные и инфекционные заболевания (ВИЧ инфекция, вирусный гепатит С, системная красная волчанка);
злокачественные опухоли;
приём лекарственных препаратов (оральные контрацептивы, психотропные средства).
Артикул:
137/138
Срок исполнения:
до 3 рабочих дней ?
Указанный срок не включает день взятия биоматериала
Цена:
1 070 руб
Взятие крови из вены:
- + 220 руб
В этом разделе вы можете узнать, сколько стоит выполнение данного исследования в вашем городе, ознакомиться с описанием теста и таблицей интерпретации результатов. Выбирая, где сдать анализ «Антитела к фосфолипидам IgM/IgG (anti-Phospholipid antibodies)» в Московском и других городах России, не забывайте, что цена анализа, стоимость процедуры взятия биоматериала, методы и сроки выполнения исследований в региональных медицинских офисах могут отличаться.
Источник