Анализ крови по антифосфолипидному синдрому
[13-062]
Развернутая диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС)
3650 руб.
Комплексное исследование лабораторных маркеров антифосфолипидного синдрома (антинуклеарного фактора, антител к кардиолипину и бета-2-гликопротеину), используемое для диагностики и оценки прогноза этого состояния.
Определяемые показатели:
- Антитела к бета-2-гликопротеину
- Антинуклеарный фактор на HEp-2-клетках
- Антитела к кардиолипину, IgG и IgM
Синонимы русские
Серологические тесты при АФС, анализы крови при АФС.
Синонимы английские
Lab Panel, Antiphospholipid Syndrome (APS), Laboratory Criteria, APS.
Метод исследования
Непрямая реакция иммунофлюоресценции.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Венозную кровь.
Как правильно подготовиться к исследованию?
- Не курить в течение 30 минут до исследования.
Общая информация об исследовании
Антифосфолипидный синдром (АФС) – это приобретенный аутоиммунный гиперкоагуляционный синдром, характеризующийся венозными и/или артериальными тромбозами и/или осложнениями беременности и наличием антифосфолипидных антител. Антифосфолипидные антитела (АФА) – это гетерогенная группа аутоантител, направленных против белков, связанных с мембранными фосфолипидами. В группу АФА входят антикардиолипиновые антитела (АКА); антитела к бета-2-гликопротеину; волчаночный антикоагулянт; антитела к аннексину V; антитела к фосфатидилсерин-протромбиновому комплексу и другие.
Хотя роль АФА в патогенезе АФС до конца не ясна, предполагается, что они являются причиной возникновения этого синдрома. Диагностика АФС сложна и носит комплексный характер. Лабораторные исследования являются неотъемлемой частью диагностического алгоритма. Во избежание ошибок необходимо понимать, какова роль лабораторных анализов в диагностике АФС и как правильно интерпретировать их результаты.
В настоящее время для диагностики АФС наиболее часто ориентируются на австралийские (сиднейские) критерии 2006 г. Эти критерии включают клинические и лабораторные признаки. К лабораторным критериям АФС относятся:
- наличие волчаночного коагулянта;
- наличие АКА класса IgG или IgM в среднем или высоком титре (более 40 фосфолипидных единиц ФЕ или в титре, превышающем 99 процентиль) при использовании метода иммуноферментного анализа, ИФА (ELISA); 1 ФЕ равна 1 мкг антитела;
- наличие антител к бета-2-гликопротеину классов IgG и/или IgM в титре, превышающем 99 процентиль, при использовании метода ИФА.
Для диагностики АФС необходимо наличие клинических и 1 или более указанных лабораторных критериев в двух или более анализах, выполненных с интервалом по крайней мере 12 недель.
Особенности интерпретации результата исследования
- Анализы на АФС характеризуются достаточно высоким процентом ложноположительных результатов (3-20 %). По этой причине их не используют в качестве скрининга у бессимптомных пациентов, в том числе у беременных женщин. Предложен следующий подход отбора пациентов, которым может быть показан анализ на АФС:
- Группа пациентов, которым целесообразно проводить исследование на АФС: пациенты молодого возраста (менее 50 лет) с необъяснимой и неспровоцированной венозной тромбоэмболией и/или артериальным тромбозом, тромбозом необычной локализации, случаи потери беременности на поздних сроках или любой тромбоз или осложнения беременности у пациентов с аутоиммунными заболеваниями (СКВ, ревматоидный артрит, аутоиммунная тромбоцитопения, аутоиммунная гемолитическая анемия);
- Группа пациентов, которым менее целесообразно проводить исследование на АФС: пациенты молодого возраста с привычным невынашиванием беременности ранних сроков, спровоцированной венозной тромбоэмболией и бессимптомные пациенты, у которых случайно было выявлено удлинение активированного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ);
- Группа пациентов, которым наименее целесообразно проводить исследование на АФС: пациенты пожилого возраста с венозной и/или артериальной тромбоэмболией.
- Прием некоторых лекарственных средств и инфекционные заболевания могут приводить к появлению АКА, что, однако, носит транзиторный характер и не связано с повышенным риском тромбоза. По этой причине проводят не менее 2 анализов с интервалом по крайней мере 12 недель. У пациентов с сифилисом, болезнью Лайма, ВИЧ-инфекцией и некоторыми другими инфекционными заболеваниями может быть ошибочно диагностирован АФС на основании положительного результата АФА и сопутствующего инсульта или артериального тромбоза другой этиологии.
- Слабоположительный титр АКА и антител к бета-2-гликопротеину не имеет клинического значения.
- Хотя антитела к бета-2-гликопротеину обычно присутствуют вместе с АКА, некоторые пациенты с АФС могут иметь только антитела к бета-2-гликопротеину. Следует помнить, что чувствительность анализа на антитела к бета-2-гликопротеину невысокая (40-50 %). Поэтому во избежание ошибок диагностики рекомендуется исследовать оба типа антител (АКА и антитела к бета-2-гликопротеину) плюс волчаночный антикоагулянт.
- В практике встречаются случаи, напоминающие по клинической картине АФС, но негативные по «стандартным» лабораторным критериям (серонегативный АФС). Диагностика АФС у таких пациентов особенно сложна. Следует отметить, что действующие критерии АФС основаны преимущественно на мнении специалистов, а не на доказательствах исследований, поэтому к ним стоит относиться критически. Прояснить ситуацию с серонегативным АФС помогут анализы на дополнительные АФА, не входящие в принятые критерии:
- Антитела к фосфатидилсерин-протромбиновому комплексу;
- АФА класса IgA. В настоящее время учитываются только аутоантитела классов IgG и IgM. Антитела класса IgA не принимаются во внимание. С другой стороны, показано, что АФА класса IgA также увеличивают риск тромбоза.
Положительный результат этих дополнительных тестов может указывать на наличие АФС, несмотря на отсутствие «стандартных» критериев состояния.
Анализ на АФА используется не только для непосредственной диагностики АФС, но и для оценки риска тромбоза. По-видимому, разные виды АФА обладают разным тромбогенным потенциалом. Кроме того, риск тромбоза зависит также и от сочетания АФА. Так, наличие трех основных видов АФА (АКА, волчаночного антикоагулянта и антител к бета-2-гликопротеину), так называемая тройная серопозитивность ассоциирована с более высоким риском тромбоза, чем позитивность только по одному из АФА. Для более точной оценки риска тромбоза у пациентов с подтвержденным АФС целесообразно исключить другие известные факторы риска гиперкоагуляции:
- Наличие системной красной волчанки (СКВ). Пациенты с СКВ имеют повышенный риск тромбообразования. Этот риск еще более повышен при сочетании СКВ с АФС. Для скрининга СКВ у пациентов с АФС используют тест на антинуклеарный фактор. Антинуклеарный фактор (АНФ, антинуклеарные антитела, АНА) — это гетерогенная группа аутоантител, направленных против компонентов собственных ядер. АНА является очень чувствительным для СКВ тестом и поэтому используется в качестве скрининга. Существует несколько способов определения АНА в крови. Метод непрямой реакции флюоресценции (РНИФ) с использованием человеческих эпителиальных клеток HEp-2 позволяет определить титр и тип свечения. Для СКВ наиболее характерны гомогенный, периферический (краевой) и крапчатый (гранулярный) типы свечения.
- Врождённая тромбофилия;
- Беременность;
- Продолжительная иммобилизация;
- Хирургическое вмешательство.
В данное комплексное исследование вошли наиболее значимые аутоантитела при АФС (АКА, антитела к бета-2-гликопротеину и АНА). Следует еще раз подчеркнуть, что, хотя лабораторные тесты играют огромную роль в диагностике АФС, их стоит оценивать только в комплексе с клиническими данными. Повторные анализы рекомендуется выполнять с помощью одних и тех же тест-систем, то есть в одной лаборатории.
Для чего используется исследование?
- Для диагностики антифосфолипидного синдрома (АФС).
Когда назначается исследование?
- При наличии симптомов венозного или артериального тромбоза у молодого (до 50 лет) пациента или тромбоза необычной локализации;
- при обследовании пациентки с привычным невынашиванием беременности, то есть при наличии в анамнезе у женщины подряд трех и более самопроизвольных прерываний беременности в сроках до 22 недель;
- при наличии других косвенных признаков антифосфолипидного синдрома: симптомов повреждения клапанов сердца (вегетаций, утолщения, дисфункции), ретикулярного ливедо, нефропатии, тромбоцитопении, преэклампсии, хореи, эпилепсии;
- при наличии тромбоза или потери беременности у пациентов с аутоиммунными заболеваниями (например, СКВ);
- наряду с волчаночным антикоагулянтом при получении увеличенного частичного тромбопластинового времени (АЧТВ);
- при получении положительного результата RPR-теста при скрининге сифилиса.
Что означают результаты?
Референсные значения
Для каждого определяемого показателя:
- Антитела к бета-2-гликопротеину
- Антинуклеарный фактор на HEp-2-клетках
- Антитела к кардиолипину, IgG и IgM
Лабораторные критерии АФС (Sidney, 2006):
- наличие волчаночного коагулянта;
- наличие АКА класса IgG или IgM в среднем или высоком титре (более 40 фосфолипидных единиц ФЕ или в титре, превышающем 99 процентиль) при использовании метода иммуноферментного анализа, ИФА (ELISA); 1 ФЕ равна 1 мкг антитела;
- наличие антител к бета-2-гликопротеину классов IgG и/или IgM в титре, превышающем 99 процентиль, при использовании метода ИФА.
Что может влиять на результат?
- Прием некоторых лекарственных средств и инфекционные заболевания (герпес-зостер, ВИЧ) могут приводить к ложноположительному результату.
Важные замечания
- Положительный результат не всегда означает наличие АФС: анализ рекомендуется повторить с интервалом по крайней мере 12 недель.
- Отрицательный результат не позволяет исключить АФС — следует помнить о наличии «серонегативного» АФС.
Также рекомендуется
[03-004] Волчаночный антикоагулянт
Терапевт, врач общей практики, ревматолог.
Литература
- Rand JH, Wolgast LR. Dos and don’ts in diagnosing antiphospholipid syndrome. Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2012;2012:455-9.
- Lim W. Antiphospholipid syndrome. Hematology Am Soc Hematol Educ Program. 2013;2013:675-80. Review.
Источник
Что такое антитела к фосфолипидам (АФЛ), анализ
Фосфолипиды клеточной мембраны
Антитела к фосфолипидам (АФЛ) — иммунный ответ организма, направленный против компонентов собственных клеток. Причина появления подобных антител чаще всего кроется в инфекционных заболеваниях и употреблении некоторых медицинских препаратов. Аутоиммунная атака угнетает функции клеток, провоцирует образование тромбов, нарушает течение беременности, негативно влияет на сосуды и нарушает естественный баланс во всём организме.
Фосфолипиды — органические вещества, входящие в состав мембран всех клеток человеческого тела. Они поддерживают гибкость клеточных мембран, защищают клетку от внешнего воздействия, способствуют транспортировке питательных веществ по организму, участвуют в процессе свёртываемости крови. Определить нарушения фосфолипидных компонентов из-за взаимодействия с АФЛ позволяют анализы на определение уровня IgM и IgG.
АФЛ способствуют развитию различных заболеваний, в зависимости от того, какой орган подвергается повреждению из-за их воздействия. АФЛ повреждают сосудистую стенку, изменяя её электрический заряд. При этом факторы свёртывания крови, не встречая сопротивления, «приклеиваются» к сосудам. Таким образом, запускается процесс тромбообразования в сосудах разной локации в организме. Разрушение фосфолипидов аутоантителами сопровождается комплексом симптомов, составляющих в целом антифосфолипидный синдром (АФС).
Показания к проведению исследования
Неизвестное заболевание сердца — показание к анализу
Анализ на уровень АФЛ проводится в случае выявления тромбов, а также при невыясненной этиологии некоторых заболеваний либо клинических ситуаций. В медицинской практике разделяют три категории пациентов, для которых исследование на АФЛ необходимо:
- женщины с акушерской патологией,
- пациенты с тромбозами неясной природы,
- молодые люди с заболеваниями сердца по идиопатической причине.
Закупорка ветвей легочной артерии — повод к сдаче теста
Анализ назначается при следующих проявлениях:
- Привычное невынашивание беременности, замершая беременность, задержка развития плода, преждевременные роды, поздний гестоз, мертворождение, плацентарная недостаточность, неэффективность проведения ЭКО.
- Тромбозы вен и артерий, гангрена конечностей, язвы ног.
- Нарушение функций клапанов сердца, инсульт, ишемические атаки,инфаркт.
- Злокачественные новообразования.
- Мигрени, внутричерепная гипертензия.
- Системные заболевания соединительной ткани.
- Ишемия мозга (тромбоз внутримозговых артерий).
- Отслойка сетчатки глаз (тромбоз артерий сетчатки).
- Почечная недостаточность (тромбоз почечных артерий).
- Закупорка лёгочной артерии либо её ветвей тромбами.
- Поражение кожных покровов.
- Аутоиммунные заболевания.
- Пониженный уровень тромбоцитов в крови.
Подготовка к анализу
Прием препаратов должен быть отменен
Для достоверного результата необходимо придерживаться рекомендаций перед изъятием крови.
- Воздержаться от приёма пищи, алкоголя, курения за 12 часов до анализа.
- В день сдачи анализа не следует употреблять чай или кофе, можно пить обычную воду.
- Все иные исследования (УЗИ, рентгенография) должны проводиться после взятия образца крови.
- На результаты анализа на АФЛ влияют медицинские препараты — гормональные контрацептивы, психотропные, антиаритмические средства, поэтому необходимо исключить их приём за 5 дней до анализа.
- Сдавать кровь для диагностики следует в утреннее время.
Как проводится исследование
Определение антител проводится в соответствии с алгоритмом
АФЛ включают в себя ряд аутоантител, но при исследовании оценивают не все иммуноглобулины. Необходимые показатели в анализе на АФЛ: антитела к кардиолипину IgM, а также IgG — волчаночный антикоагулянт.
Антитела к кардиолипину определяют при помощи твёрдофазного иммуноферментного анализа для b-2-гликопротеин 1- зависимых АФЛ. Стрип с 8 пробирками покрывают кардиолипином и добавляют b-2-гликопротеин. Если в образце крови присутствуют АФЛ, происходит связывание IgM с антигенами на твёрдой фазе. Для их обнаружения вводят фермент, окрашивающий пары антиген-антитело. По интенсивности окраски определяется концентрация антител к кардиолипину.
Также проводится исследование IgG, но помимо оценки связывания, учитываются следующие параметры:
- Определение фосфолипидзависимой фазы свёртывания крови с учётом тромбопластинового и каолинового времени, а также время свёртывания с использованием разведённого яда гадюки по тесту Рассела.
- Возможность коррекции удлинённого времени диагностических тестов при помощи добавления нормальной безтромбоцитарной плазмы.
- Оценка изменения времени диагностических тестов при смешивании образца крови с избыточной массой фосфолипидов.
Норма и отклонения
Стрептококковая инфекция может исказить результат
Референтные значения для нормального уровня АФЛ:
- IgM: 0-10 MPL-U-ml;
- IgG: 0-10 GPL-U-ml.
Результат теста оценивается наряду с показателями дополнительных лабораторных и инструментальных исследований. Наличие только повышенного уровня IgM либо IgG не является достаточным для постановки диагноза.
Следует учесть, что временное повышение АФЛ сопровождает не только приём некоторых медицинских препаратов, но и ряд инфекционных заболеваний, поэтому анализ необходимо сдавать дважды с разницей в 4-6 недель.
Заболевания, при которых растёт уровень АФЛ:
- инфекции, вызванные бактериями стафилококка и стрептококка;
- туберкулез;
- краснуха;
- микоплазмоз;
- болезнь Филатова;
- герпес;
- корь.
На результаты теста влияет гепарин
Также на результаты теста влияет приём препаратов:
- Гепарин,
- Пенициллин,
- Хинидин,
- Фенотиазин,
- Гидралазин,
- Прокаинамид,
- Синтетические аналоги эстрогена и прогестерона.
Расшифровка результата исследования
Правильная интерпретация — верный диагноз
Положительный тест. Повышенный уровень АФЛ интерпретируется:
- риск образования тромбов;
- риск осложнений во время беременности;
- АФС (при наличии иных подтверждающих показателей);
- патология сосудистой системы;
- системные заболевания (красная волчанка);
- СПИД;
- сифилис;
- малярия.
Отрицательный тест означает, что уровень АФЛ не был повышен, но при наличии явных симптомов анализ назначается повторно.
Источник
Метод определения
Твёрдофазный иммуноферментный анализ (в наборе применяется смесь высоко очищенных отрицательно заряженных фосфолипидов — кардиолипин, фосфатидилсерин, фосфатидилинозитол, фосфатидная кислота, насыщенная человеческим бета-2-гликопротеином).
Исследуемый материал
Сыворотка крови
Важный диагностический критерий антифосфолипидного синдрома (АФС). Антитела к фосфолипидам (АФЛ) — это аутоиммунные, или аутоантитела класса IgG и IgM, действие которых направлено против основных компонентов клеточных мембран — фосфолипидов и, соответственно, против собственных клеток и тканей организма. Фосфолипиды могут быть отрицательно заряженными (фосфатидилсерин, кардиолипин), положительно заряженными (фосфатидилинозитол и фосфатидиловая кислота), нейтральными (фосфатидилхолин). Клеточные мембраны играют важную роль в инициации процессов свёртывания крови. Из анионных (отрицательно заряженных) АФЛ фосфатидилсерин является наиболее антигенным. Фосфатидилсерин находится на внутренней поверхности тромбоцитов и клеточных мембран эндотелия сосудов. При активации клеток фосфатидилсерин перемещается на поверхность клетки и принимает участие в формировании кровяного сгустка (тромба), входит в протромбиназный комплекс и играет физиологическую роль в коагуляции. Антитела к фосфолипидам (АФЛ) нарушают нормальное функционирование эндотелия кровеносных сосудов, вызывая васкулопатии (сужение сосудов) и образование сосудистых тромбов. Взаимодействие АФЛ с фосфолипидами представляет собой сложный феномен, в реализации которого важную роль играют так называемые кофакторы. Один из них — бета-2-гликопротеин, присутствующий в нормальной плазме и циркулирующий в ассоциации с липопротеинами (аполипопротеин Н). Он обладает естественной антикоагулянтной активностью. При АФС антифосфолипидные антитела связываются эндотелием сосудов в присутствии бета-2-гликопротеина, стимулируют синтез фактора Виллебранда, индуцируют активность тканевого фактора эндотелиальными клетками, стимулируют процесс гемокоагуляции. Высокий уровень антифосфолипидных антител характерен для антифосфолипидного синдрома (АФС), при котором поражаются сосуды сердца, головного мозга, почек, печени, надпочечников. У мужчин высокий титр антител к фосфолипидам часто сопровождается риском развития тромбоза вен, инфаркта миокарда, а у женщин — повторными выкидышами (чаще в 2 и 3 триместре беременности). Антитела к фосфолипидам клеток эндотелия сосудов нарушают равновесие между свёртывающей и противосвёртывающей системами в сторону образования тромбов. Подобные изменения микроциркуляции при беременности могут приводить к нарушению кровообращения также и в области плаценты и даже к отторжению плода. Кроме того, АФС может сопровождаться нарушением мозгового кровообращения с развитием инсульта, неврологической патологией, поражением кожи (сетчатое ливедо, кожные язвы). Частота обнаружения антител к фосфолипидам у здоровых людей составляет 2 — 4%, чаще пожилого, чем молодого возраста.
Пределы определения: 0,5 Ед/мл – 100 Ед/мл
Источник